十招致敌！不再烦恼移液污染

Overview
在移液操作中，要获得可靠的结果，防止污染至关重要。需要辨识出潜在的污染机制，以便制定针对性的解决方案。

气溶胶，是指悬浮在气体中的固体或液体颗粒，通常产生于许多实验室活动中，例如使用空气正压式原理的移液器进行移液时，而气溶胶是移液操作中的重要污染来源。在使用非过滤式的移液器吸头时，气溶胶可能转移至移液器内部，继而导致后续的样本受到污染。轻缓小心的移液操作有助于减少气溶胶的形成。

本文将讨论产生于移液操作的三种污染类型：
- 移液器对样本的污染
- 样本对移液器的污染
- 样本对样本的污染

文末，还有10个避免移液污染的小贴士，为你的移液工作排除忧患。

1. 移液器对样本的污染

当受污染的移液器或移液器吸头污染样本时，就会造成这种类型的污染。

大多数制造商生产的移液器吸头有多种纯度级别。纯度可分为三个级别:

- 无纯度证明
- 有证明不含 DNA 酶、RNA 酶和内毒素等污染物
- 经过灭菌，不含微生物

DNA酶、RNA酶和内毒素等污染物难以通过任何灭菌法去除，因此，在制造期间防止污染非常重要。需要单独检测是否含有这些污染物，通常由第三方实验室进行。制造后灭菌可确保吸头在交付给客户时不含任何微生物（细菌、virus等）。

移液器吸头还可以是浸出物（源自材料或工艺设备，会污染样本的痕量化学品）的潜在来源。潜在浸出物包括重金属、紫外稳定剂、抗氧剂、色素、脱模剂、生物杀菌剂和表面活性剂等。高品质的吸头是由100%纯聚丙烯，在高质量的生产设备中制造而成，且不含浸出物。建议您与吸头制造商确认这一点。

在日常的实验室工作中，通过以下这些简单的准则可避免移液器至样本的污染：

- 针对应用选择相关纯度级别的吸头。
- 使用（预灭菌的）滤芯吸头或正压置换式吸头。
- 对于某些制造商生产的移液器，可使用安全圆锥过滤器。过滤器可防止气溶胶进入移液器内部并污染后续的样本。
- 在每个样本操作后，务必更换移液器吸头。
- 定期对可能接触样本的移液器或组件进行高压灭菌或消毒。
 

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2. 样本对移液器的污染
当被转移的液体或来自被转移液体的气溶胶颗粒进入移液器内部时，即发生这种类型的污染。为将样本对移液器的污染风险降低，建议采取以下预防措施：

- 松开移液器按钮时务必要缓慢，以防止移液器吸头内有气溶胶形成和不受控的液体飞溅。
- 在移液期间保持移液器垂直，并将移液器垂直存放。这能防止液体流进移液器内部。
- 使用滤芯吸头或正压置换式吸头，以防止气溶胶从样本进入移液器内部。或者，可以在移液器吸头上使用安全圆锥过滤器。

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3. 样本对样本的污染
当来自某个样本的气溶胶或液体残留被带到下一样本时，即发生样本对样本的污染（也叫残留污染）。例如，当同一移液器吸头被多次使用时，即发生这种污染。为避免残留污染：

- 使用滤芯吸头或正压置换式吸头，以防止气溶胶从样本进入移液器内部，再进入下一样本。或者，可以移液器洗头上使用安全圆锥过滤器。
- 在每个样本操作后，务必更换移液器吸头。
- 如果怀疑移液器受到污染，请按制造商的说明对移液器进行高压灭菌或消毒。

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定义
 

去污
任何通过降低微生物负荷以防止污染的活动。包括各种灭菌、消毒和杀菌方法。

灭菌
灭活所有微生物，包括细菌内生孢子。可通过使用蒸汽、加热、化学品或辐射来实现。
 

高压灭菌
对实验室来说，高压灭菌（湿热）是一种有效的灭菌法。例如：使用高温高压的饱和蒸汽来灭活微生物，以及对实验室塑料和玻璃器皿等的去污处理。曝露时间和温度至关重要。此外，蒸汽需要穿透整个微生物负荷方可有效地净化。
 

消毒
清除几乎所有病原性微生物（不包括细菌内生孢子）并将微生物污染降低至可接受的水平。这是一种用于表面净化的实用方法。应根据设想的污染类型选择消毒剂（如：醇类、酚类化合物、卤素）、浓度和曝露时间。
 

杀菌
对活组织应用抗微生物化学品以消除微生物。

DNA酶
一类强大的酶(核酸酶)，可通过将 DNA 水解成短片段来降解它。在 DNA 纯化期间，即使是痕量的 DNA 酶，也可导致 PCR 等DNA技术产物产率低、无产物或产物降解。污染源：与人接触、唾液、细菌。

RNA酶
一类强大的酶(核酸酶),可催化 RNA 降 解成短的片段。这类酶非常稳定，难以去除。污染源：皮肤油脂、毛发、眼泪、细菌。

内毒素
脂多糖（一种大分子）是大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏杆菌、假单胞菌和嗜血杆菌等革兰氏阴性菌外膜的组成部分。可造成人发烧并损害细胞培养物的生长。当细菌死亡和细胞壁被破坏时，它会被释放到环境中。污染源：内毒素存在于细菌能生长的任何地方，如：空气，水，土壤，皮肤，原材料，任何非无菌环境等。

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《避免移液污染的10大注意事项》